Técnica de Fluorescência-Anticorpo para Detecção de uma Bactéria Particular em uma Amostra

Leia este artigo para aprender sobre o Princípio da Técnica de Fluorescência-anticorpo para a detecção de uma bactéria em particular em uma amostra!

Objetivo de aprender o princípio da imunofluorescência ou técnica de fluorescência-anticorpo para detecção de bactérias particulares em uma amostra.

A técnica de fluorescência-anticorpo ou imunofluorescência é um procedimento rápido e confiável para a detecção de bactérias específicas em uma amostra. Um número de anticorpos, marcados com corantes fluorescentes, tais como isocianato de fluoresceína ou isotiocianato, cada um específico para bactérias particulares estão disponíveis.

Um desses anticorpos rotulados, específico para as bactérias específicas a serem detectadas, é adicionado em gotas a uma amostra fixa de calor da amostra desconhecida de bactérias em uma lâmina e espalhada suavemente sobre a superfície do esfregaço. Um papel de filtro umedecido é colocado dentro de uma placa de Petri.

Em seguida, a lâmina é colocada dentro dela em uma vareta de vidro em forma de U e incubada a 25 ° C por 35 minutos. O excesso de anticorpos no esfregaço é lavado com solução salina tamponada com fosfato a 1%. A lâmina é imersa em um frasco de Coplin contendo 1% de solução salina tamponada com fosfato a 25 ° C por 10 minutos. O slide é secado por papel absorvente. Uma gota de glicerol é adicionada ao esfregaço. É coberto com uma lamínula e examinado sob um microscópio de fluorescência.

Se a bactéria específica do anticorpo marcado estiver presente na amostra desconhecida de bactérias, um complexo antígeno-anticorpo é formado (aqui as bactérias são o antígeno). Como o anticorpo é marcado com uma substância fluorescente, o complexo antígeno-anticorpo emite fluorescência, quando observado sob microscópio de fluorescência. Se as bactérias específicas do anticorpo estiverem ausentes, o anticorpo fluorescente é lavado e a fluorescência não é observada.