2 Tipos de métodos de eletroforese de proteínas séricas (com figura)

O soro tem várias proteínas. Em 1937, Arne W Tiselius introduziu o método de separação das diferentes proteínas em um campo elétrico.

Na eletroforese, as proteínas são separadas em um campo elétrico. Posteriormente, foi desenvolvida eletroforese de zona em papel ou acetato de celulose. Em 1952, foi desenvolvido um método de dois estágios que combinou a eletroforese com a imunodifusão. Posteriormente, C Williams, P Graber e M Poulik introduziram o método clássico de Imunoeletroforese (em que tanto a eletroforese quanto a dupla imunodifusão são realizadas na mesma lâmina revestida com ágar).

1. Eletroforese de Zona:

As proteínas podem ser separadas com base em suas cargas elétricas superficiais. Um meio de suporte inerte como papel, acetato de celulose ou ágar é usado para a separação. A amostra de soro é colocada no meio de suporte. O meio de suporte é então ligado aos pólos positivo e negativo do aparelho de eletroforese. Sob o campo elétrico, as proteínas são carregadas e se movem pelo meio de suporte. Seu movimento depende da carga elétrica.

Como diferentes moléculas de proteína têm cargas diferentes, elas se movem para diferentes posições no meio de suporte. Normalmente, a eletroforese é realizada por 60-120 minutos ou mais. Em seguida, as proteínas são coradas e examinadas visualmente ou digitalizadas em um densitômetro. O densitômetro de varredura das frações de proteína separadas e coradas converte cada banda em padrão em seu pico característico e ajuda na quantificação de cada fração protéica.

2. Electroforese de proteínas séricas:

O soro humano normal é separado em cinco grandes bandas eletroforéticas: albumina, α1-globulina, α2-globulina, β-globulina e y-globulina (Fig. 27.5).

A eletroforese de zona é útil no diagnóstico de certas doenças humanas:

Figs 27.5A a C:

Electroforese em fita de acetato de celulose e varrimento do densitómetro da tira de papel de acetato de celulose: A e A1: bandas normais de proteína sérica em fita de acetato celular visualizadas após coloração (A) e varrimento densitométrico de tira de acetato de celulose (A1).

B e B1: Hipergamaglobulinemia

C e C1: hipogamaglobulinemia

Eu. Mieloma múltiplo e macro-globulinemia de Waldenstrom. Nestas doenças, um pico de proteína restrito eletroforeticamente geralmente ocorre na região de γ-globulina. O pico representa um acúmulo de uma imunoglobulina monoclonal. As imunoglobulinas monoclonais têm uma carga de superfície definida e, portanto, um pico é produzido (enquanto que o padrão normal de imunoglobulinas policlonais produz um esfregaço na região da globulina-y).

ii. Hipogamaglobulinemia (diminuição marcada na gamaglobulina sérica).

iii. Hipoproteinemia (redução acentuada em todas as proteínas séricas).

iv. Hipoalbuminemia:

Redução da albumina, que ocorre em muitas doenças do fígado e rins.

v. A eletroforese de urina auxilia na detecção de cadeias leves de imunoglobulina livre, como a proteína de Bence-Jones.

vi. A eletroforese de zona do líquido cefalorraquidiano (LCR) auxilia no diagnóstico da esclerose múltipla e de outros distúrbios do sistema nervoso central. A eletroforese de proteínas séricas é considerada um ensaio de rastreamento para detecção de anormalidades proteicas. Mais análises são necessárias para encontrar as anormalidades específicas.