Teste Catalase em Bactérias para Descobrir a Capacidade de Degradar o Peróxido de Hidrogênio (Com Figura)
Catalase Teste em bactérias para descobrir sua capacidade de degradar peróxido de hidrogênio (com figura)!
Princípio:
Algumas bactérias têm a capacidade de degradar o peróxido de hidrogênio (H 2 0 2 ) em água (H 2 O) e oxigênio (0, ↑), pois podem produzir a enzima 'catalase'.
A quebra do peróxido de hidrogênio pela catalase é indicada por bolhas de oxigênio livre gasoso (0, ↑).
No teste de catalase, um loop das bactérias de teste é colocado em uma gota de peróxido de hidrogênio tomada em um slide. Se a bactéria tem a capacidade de produzir catalase, quebra o peróxido de hidrogênio (H 2 O 2 ) em água e oxigênio. A produção de oxigênio resulta em borbulhamento ou formação de espuma, o que pode ser notado na queda.
Materiais requisitados:
Slides, papel absorvente, alça de inoculação, bico de bunsen, câmara de fluxo laminar, peróxido de hidrogênio (3%), colônias isoladas ou culturas puras de bactérias.
Procedimento:
1. Uma lâmina é limpa sob água da torneira (Figura 7.18).
2. A lâmina é limpa com papel absorvente e seca ao ar.
3. Uma gota de peróxido de hidrogênio (3%) é tirada no centro da lâmina.
4. Um loop das bactérias de teste é coletado assepticamente, preferencialmente em uma câmara de fluxo laminar, com a ajuda de uma alça esterilizada por chama e colocado na gota de peróxido de hidrogênio na lâmina. O laço é esterilizado após cada inoculação.
Observações:
1. Borbulhar ou formar espuma ocorre na queda: Catalase positiva.
2. Borbulhar ou formar espuma não ocorre na queda: catalase negativa.
Precauções:
Uma cultura de bactérias de meio de ágar de sangue não pode ser usada para o teste de catalase, pois o sangue contém catalase e sempre dá resultado positivo. As bactérias negativas para catalase tendem a morrer em meio isento de açúcar, porque produzem H2O2 ou porque o H2O2 se acumula no meio, quando são expostas ao ar e à luz.
Portanto, culturas de estoque dessas bactérias devem ser armazenadas no escuro e onde o acesso ao ar é limitado. A catalase é encontrada em quase todas as bactérias que podem crescer aerobicamente. Como a enzima é produzida apenas por bactérias viáveis, as culturas com mais de 24 horas não podem ser usadas para o teste da catalase.